スフィアアッセイ

スフィアアッセイ （Sphere assayあるいはSpheroid colony assay） とは，もともとは正常な神経幹細胞の培養方法として確立されたものであり，プレート表面を特殊加工して上皮細胞が決して接着しない条件で，血清無添加培地に上皮細胞成長因子（epidermal growth factor：EGF） および塩基性線維芽細胞成長因子 （basic fibroblast growth factor：bFGF） のみを加えて，数週間培養して球状のコロニーが形成されるかどうかを調べるアッセイである （ただし論文によってはEGFのみを加えている場合もある）．2010年１月現在，このような特殊なプレートは，“Ultra Low Attachment Culture Dish”という名称で，Corning社から発売されている．このアッセイ法は，古典的なソフトアガーを用いたコロニー形成アッセイを現代的にアレンジしたものといえるであろう．研究者によっては今でもアガロースゲルを用いたコロニーアッセイを好む方が多いようであるが，筆者の経験ではソフトアガーアッセイは，用いるゲルの濃度によって結果が異なったり，再現性が得にくいなどの欠点があるように思う．対照的に，スフィアアッセイはきわめて簡単でデータの再現性も得られやすい．

参考書籍

• 実験医学 2010年3月号 Vol.28 No.4 特集「癌幹細胞の発生とstemness維持」
• 実験医学増刊 Vol.29 No.20 特集「がん幹細胞—ステムネス，ニッチ，標的治療への理解」