PCR反応を用いずに標的を検出する方法.Invasiveプローブとレポータープローブが一部オーバーラップした形で標的にハイブリダイズするとレポータープローブの5´フラップが切断される.このフラップは2次反応テンプレート(SRT)にFRET(fluorescence resonance energy transfer)プローブ〔蛍光色素(F)とクウェンチャー(Q)を含む〕とやはり一部オーバーラップした形でハイブリダイズし,FとQの間で切断が起こり,蛍光シグナルにより標的が検出される.切断されなかったレポータープローブはアレスターオリゴとハイブリダイズし,SRTとのハイブリダイズはブロックされる.