実験医学別冊 最強のステップUPシリーズ:miRNA研究からがん診断まで応用∞! エクソソーム解析マスターレッスン〜研究戦略とプロトコールが本と動画でよくわかる
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実験医学別冊 最強のステップUPシリーズ

miRNA研究からがん診断まで応用∞!

エクソソーム解析マスターレッスン

研究戦略とプロトコールが本と動画でよくわかる

  • 落谷孝広/編
  • 2014年11月25日発行
  • B5判
  • 86ページ
  • 付録:DVD
  • ISBN 978-4-7581-0192-9
  • 定価:5,390円(本体4,900円+税)
  • 注文不可
    在庫:なし
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医学・生物学で注目の細胞外小胞「エクソソーム」研究に実験書が初登場.エクソソームの回収法や特異的RNA/タンパク質の検出法,そして診断・医薬への応用戦略までを一冊に凝縮.基本手技が見て解る動画付録.

目次

基本編 [総説] エクソソームの新展開:疾患診断と治療に向けての展望

1. エクソソームがもたらす生命科学へのパラダイムシフト エクソソーム研究の過去,現在,未来

・エクソソームとは
・エクソソームが細胞間情報伝達の常識を変える
・さまざまな生命現象とエクソソーム
・エクソソームが医療を変える

2. がんにおけるエクソソームのかかわりとその臨床応用 エクソソームを標的とした治療へ向けて

・はじめに
・がんにおけるエクソソームのかかわり
・エクソソームの臨床応用について
・おわりに

3. エクソソーム研究を通して見える将来の診断法

・はじめに
・エクソソームmiRNAによる診断
・エクソソーム膜タンパク質の検出による診断
・おわりに

実践編 [プロトコール] エクソソーム解析技術と試薬・キット

1. 培養上清・体液からエクソソームを回収するための準備

・はじめに
・一般的な解析に必要なエクソソーム量
(1) 培養細胞の培養上清の準備
  • 接着細胞の培養上清からのエクソソームの回収
  • 浮遊細胞の培養上清からのエクソソームの回収
(2) 体液の前処理
  • 血液(血清)からのエクソソームの回収
  • 唾液からのエクソソームの回収
  • 尿からのエクソソームの回収
・おわりに

2. 超遠心法によるエクソソームの回収

・はじめに
(1) エクソソームの回収・洗浄
  • エクソソームの回収
  • エクソソームの洗浄
  • 回収後のエクソソームの調製
(2) スクロースクッションを用いたエクソソームの粗精製
(3) 密度勾配遠心法によるエクソソームの分離
・おわりに

3. 回収したエクソソームを利用した実験例

・はじめに
(1) エクソソームのタンパク質の濃度測定
  • Micro BCA Protein Assay Kitを用いたタンパク質の濃度測定
  • Qubit Protein Assay Kitを用いたタンパク質の濃度測定
(2) ウエスタンブロット法によるエクソソームマーカーの検出
(3) 蛍光色素を用いたエクソソームの標識〜細胞への取り込みを可視化するために
(4) エクソソームからのRNAの抽出
(5) 抽出したRNAの品質チェック
・おわりに

4. エクソソーム関連試薬および機器を用いた実験例

・はじめに
(1) NanoSight
(2) 遠心によるエクソソーム回収キット(Total Exosome Isolation)を用いた血清または尿からのエクソソームの回収
(3) 免疫沈降法によるエクソソームの検出
(4) ExoScreen法の簡易プロトコール
・おわりに

付録DVDのご紹介 Online Supplemental Data

  • 2分0秒 2014年12月16日公開
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