あなたの細胞培養、大丈夫ですか?!〜ラボの事例から学ぶ結果を出せる「培養力」
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あなたの細胞培養、大丈夫ですか?!

ラボの事例から学ぶ結果を出せる「培養力」

  • 中村幸夫/監,西條 薫,小原有弘/編
  • 定価 3,500円+税
  • 2015年10月発行
  • A5判
  • 246ページ
  • ISBN 978-4-7581-2061-6
  • 販売状況: 注文可能
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医学・生命科学・創薬研究に必須とも言える「細胞培養」.でも,コンタミ,取り違え,知財侵害…など熟練者でも陥りがちな落とし穴がいっぱい.こうしたトラブルを未然に防ぐ知識が身につく「読む」実験解説書です.

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目次

第1章 細胞培養の準備はできていますか?

I. 培養液と培養容器

(1)「既製培地はボトルを開ければすぐに使える」と思っていませんか?
  • キーワード
  • 既製培地,グルタミン不含,必須アミノ酸
(2)培地カタログの型番違い,「大差ない」と思っていませんか?
  • キーワード
  • 基礎培地,標準組成と変法,培地成分の含・不含
(3)紫色に変色した培地を使っていませんか?
  • キーワード
  • 至適pH,重炭酸イオンとCO2
(4)血清のロットチェックや熱非働化は「必要ない」と思っていませんか?
  • キーワード
  • 血清のロットチェック,熱非働化,再現性
(5)抗生物質で微生物汚染は防げる!と思っていませんか?
  • キーワード
  • 抗生物質使用の弊害,抗生物質の適正使用,適切な無菌操作
(6)サイトカインの濃度,安易に変えていませんか?
  • キーワード
  • サイトカイン,ED50,unit
(7)「これでも培養できるし……」という理由で培地を変えていませんか?
  • キーワード
  • 培地の系統,馴化,再現性
(8)培養器の選択,間違っていませんか?
  • キーワード
  • シャーレとフラスコ,閉鎖培養と開放培養,コーティング

II. 培養に必要となる設備や備品

(9)無菌操作に適した環境が整っていますか?
  • キーワード
  • 培養室の清潔管理
(10)「細胞培養はクリーンベンチで」と思い込んでいませんか?
  • キーワード
  • クリーンベンチ,安全キャビネット,バイオセーフティーレベル(BSL)
(11)とりあえず「インキュベーターに入れれば細胞は育つ」と思っていませんか?
  • キーワード
  • CO2インキュベーターの設定とメンテナンス
(12)遠心操作は「低温の方が細胞に優しい」と思っていませんか?
  • キーワード
  • 遠心の温度,遠心回転数
(13)位相差顕微鏡のしくみ,知らずに使っていませんか?
  • キーワード
  • 細胞写真
(14)「滅菌=消毒」だと思っていませんか?
  • キーワード
  • 滅菌,インジケータ
(15)使用済みの培地を流しに捨てていませんか?
  • キーワード
  • 産業廃棄物,感染性廃棄物

III. 細胞の入手・輸送

(16)細胞の身元不明のまま培養を始めていませんか?
  • キーワード
  • 細胞の入手方法,培養前の準備,培養方法の確認
(17)「培養している細胞は永久に増やせる」と思っていませんか?
  • キーワード
  • 有限増殖細胞,クライシス,細胞株
(18)送り先の環境や季節を考慮せずに細胞を輸送していませんか?
  • キーワード
  • 細胞の梱包,輸送手段と温度,ドライシッパー

第2章 細胞の培養操作に慣れていますか?

IV. 基本事項

(1)「細胞株は変わらない」と思っていませんか?
  • キーワード
  • 長期培養,継代数,不均一性
(2)無菌操作の要点を理解せずに培養していませんか?
  • キーワード
  • 無菌操作,コンタミ
(3)休日を挟んでの培養,油断していませんか?
  • キーワード
  • 培養管理,炭酸ガス(CO2),オーバーグロース
(4)論文投稿に重要な「培養記録」をちゃんと作成・保存していますか?
  • キーワード
  • 実験記録

V. 細胞数の計測

(5)細胞の計数間違い,機械のせいにしていませんか?
  • キーワード
  • 細胞計数,セルカウンター(自動細胞計数装置)
(6)増殖曲線を作製せずに細胞を凍結していませんか?
  • キーワード
  • 増殖曲線,血球計算盤,凍結

VI. 継代培養の方法

(7)「浮遊細胞の継代なんてワンパターンで簡単!」と思っていませんか?
  • キーワード
  • 浮遊細胞,継代,細胞密度
(8)付着細胞の継代,注意点をいくつ知っていますか?
  • キーワード
  • 酵素処理,クロスコンタミネーション
(9)継代数と細胞分裂回数(PDL)を同じものと思っていませんか?
  • キーワード
  • PDL/細胞集団倍加回数,継代数

VII. 特殊な細胞の培養

(10)「培養しやすさはどの細胞もだいたい同じでしょ」と思っていませんか?
  • キーワード
  • 特殊な細胞株
(11)有限寿命細胞,むやみに分裂させていませんか?
  • キーワード
  • プライマリー細胞(初代培養細胞),分裂限界(寿命)
(12)同じ組織から分離した細胞はみんな同じだと思っていませんか?
  • キーワード
  • 個体差,プライマリー細胞(初代培養細胞)

VIII. 凍結保存

(13)細胞の凍結と融解,のんびりやっていませんか?
  • キーワード
  • 凍結・融解,DMSO,細胞毒性
(14)いつも同じ方法で融解していませんか?
  • キーワード
  • 凍結保存法,ガラス化法
(15)凍結細胞を−80℃で保存していませんか?
  • キーワード
  • 長期保存,液体窒素

IX. 長期使用のための工夫

(16)ストックの作製,後回しにしていませんか?
  • キーワード
  • マスターストック,ワーキングストック

第3章 細胞の特性解析はできますか?

X. 基本的な品質管理

(1)微生物汚染をゴミと勘違いして見逃していませんか?
  • キーワード
  • 培養液の濁り,微生物汚染,セルデブリス
(2)目に見えないマイコプラズマ汚染を見過ごしていませんか?
  • キーワード
  • マイコプラズマ汚染,マイコプラズマ検査
(3)ウイルス汚染を知らないまま細胞を培養していませんか?
  • キーワード
  • ウイルス産生細胞,ウイルス汚染,ウイルスチェック
(4)培養細胞・ヒト試料からの感染リスクを理解していますか?
  • キーワード
  • ヒト感染性ウイルス,ウイルス検査
(5)あなたの使っている細胞は本当に正しい細胞ですか?
  • キーワード
  • クロスコンタミネーション(細胞誤認),STR検査

XI. 特殊な特性解析

(6)染色体が正常か異常かわからないまま培養していませんか?
  • キーワード
  • 染色体解析,シングルセル解析,低張液処理
(7)培養はOK……では発現解析の準備はできていますか?
  • キーワード
  • 発現解析
(8)分化誘導実験,定期的にストックに立ち返っていますか?
  • キーワード
  • ES/iPS細胞,分化能解析,未分化性確認
(9)生体から取り出した細胞の性質が培養中も保たれていると思っていませんか?
  • キーワード
  • in vivo での再現性,性質の変化

XII. 細胞の独自性と信頼性

(10)「細胞の名前はその細胞固有のもの」と信じていませんか?
  • キーワード
  • 細胞名,細胞バンク,取り違い
(11)論文投稿規定を満たせる細胞品質管理ができていますか?
  • キーワード
  • 論文投稿規定,細胞品質管理

第4章 細胞利用に関する規制を知っていますか?

XIII. 知的財産権

(1)他人の財産権を侵害していませんか?
  • キーワード
  • 知的財産権
(2)安易な気持ちで細胞入手を考えていませんか?
  • キーワード
  • 細胞入手,細胞分与
(3)企業との共同研究における細胞使用,研究者どうしと同じに考えていませんか?
  • キーワード
  • 企業との共同研究,営利目的利用

XIV. 安全性

(4)培養細胞のバイオセーフティーレベル(BSL)に注意をしていますか?
  • キーワード
  • バイオセーフティーレベル(BSL),ヒト試料
(5)「遺伝子組換え細胞は遺伝子組換え生物に該当する」と思っていませんか?
  • キーワード
  • 遺伝子組換え生物,カルタヘナ法

XV. ヒト細胞に関する倫理

(6)ヒト細胞を用いた解析,インフォームド・コンセントは十分ですか?
  • キーワード
  • インフォームド・コンセント(IC),倫理指針,ヒト細胞
(7)そのヒトES/iPS細胞実験,倫理規制に反していませんか?
  • キーワード
  • ES/iPS細胞

XVI. 国際条約と国内の法令等

(8)国際条約を無視して細胞を国外輸送しようとしていませんか?
  • キーワード
  • 安全保障貿易管理,ワシントン条約
(9)細胞利用に関連する法令や指針を守っていますか?
  • キーワード
  • 動物実験

巻末付録

付表ダウンロードのご案内

『第2章 細胞の培養操作に慣れていますか?』より抜粋

あなたの細胞培養、大丈夫ですか⁈ 立ち読み1 あなたの細胞培養、大丈夫ですか⁈ 立ち読み2 あなたの細胞培養、大丈夫ですか⁈ 立ち読み3 あなたの細胞培養、大丈夫ですか⁈ 立ち読み4

−後略−

本書掲載のチェックリストと表を,ダウンロードいただけます.皆様の培養にぜひお役立てください.

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【第1章-16】78ページ
細胞培養チェックリスト [ファイル名] checklist.pdf
【第2章-4】103ページ
培養記録の見本 [ファイル名] baiyokiroku.zip
※ Microsoft Excelファイルをzip圧縮しております.解凍ソフトで解凍してからお使いください.

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  • 【本書名】あなたの細胞培養、大丈夫ですか?!〜ラボの事例から学ぶ結果を出せる「培養力」
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