実験医学別冊:バイオ実験で失敗しない! 検出と定量のコツ〜核酸からタンパク質,脂質まで,確実なデータを出す実践的ノウハウと最適なキット・機器の活用法
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実験医学別冊

バイオ実験で失敗しない!

検出と定量のコツ

核酸からタンパク質,脂質まで,確実なデータを出す実践的ノウハウと最適なキット・機器の活用法

  • 森山達哉/編
  • 2005年06月27日発行
  • B5判
  • 234ページ
  • ISBN 978-4-89706-483-3
  • 定価:3,500円+税
  • 注文不可
    在庫:なし

「シグナルが出ない/もっと高感度に検出したい/データにバラツキが…」誰もが使う手法なのになぜか失敗の多い検出・定量がテーマの初の実験書!機器・キットの選択や使い分けを目的別に製品名を挙げて詳細に解説したこれまでにない画期的な内容.

目次

第1章 各種検出機器・器具について

1.蛍光スキャナ【森山達哉】

  • はじめに
  • 蛍光スキャナについて
  • 蛍光スキャナによるアプリケーション例
  • 蛍光スキャナの使用上のコツ

2.CCDカメラタイプイメージャー【森山達哉】

  • はじめに
  • CCDカメラタイプイメージャーのバリエーション
  • CCDカメラタイプイメージャーの使用上のコツ

3.マイクロタイタープレートリーダー【森山達哉】

  • はじめに
  • 選定・使用する際のポイント
  • マイクロタイタープレートリーダー使用上のコツ

4.そのほかの検出機器【森山達哉】

  • はじめに
  • さまざまな用途・目的に合わせた検出機器を選ぼう
  • 一般的な検出機器の使用に関するコツ

第2章 タンパク質の検出と定量のコツ

1.総タンパク質の定量法あれこれ【森山達哉】

  • はじめに
  • さまざまなタンパク質定量法
  • キットを用いたタンパク質定量のコツ

2.ウエスタンブロッティングのコツ【森山達哉】

  • はじめに
  • 実験の流れ
  • 化学発光法によるウエスタンブロッティングのコツ

3.ウエスタンブロッティングの検出法あれこれ【森山達哉】

  • はじめに
  • ウエスタンブロッティングの各種検出法
  • 酵素標識抗体の検出試薬
  • ウエスタンブロッティングの各種検出法の比較
  • 検出に適した装置について
  • ウエスタンブロッティング検出法の選択のコツ

4.いろいろなELISA法:検出法も含めて【森山達哉】

  • はじめに
  • ELISA系の選択のコツとポイント
  • さまざまなELISA検出法
  • 多様なELISA法とその検出法の選択のコツ

5.サンドイッチELISA系をつくってみよう【森山達哉/小笹清香】

  • はじめに
  • 何が必要か?
  • 抗体の組み合わせについて
  • プロトコール例
  • 結果の評価
  • 結果の例
  • サンドイッチELISAのコツ

6.抽出困難なサンプル中のターゲット分子の抗体を用いた半定量法【森山達哉/小笹清香】

  • はじめに
  • タンパク質抽出とサンプル調製
  • 総タンパク質の定量
  • ウエスタンブロッティングを行う場合
  • サンドイッチELISAを行う場合
  • 抗原固相化による半定量ELISAを行う場合
  • ドットブロットによる半定量
  • プロトコール例(ドットブロットによる半定量)
  • 抽出困難なサンプル中の抗体を用いた半定量法のコツ

7.タンパク質の電気泳動後の染色法【森山達哉】

  • はじめに
  • いろいろな染色試薬
  • 電気泳動後のゲル内でのタンパク質の染色のコツ

8.ペプチドの検出・定量法【大日向耕作/吉川正明】

  • はじめに
  • ペプチドの取り扱いに関する注意点
  • HPLCによるペプチドの分離のコツ
  • ペプチドの検出・定量法
  • ペプチドの検出・定量法のコツ

9.メンブレンに転写された総タンパク質の検出法【森山達哉】

  • はじめに
  • メンブレンに転写された総タンパク質を検出するさまざまな方法
  • サイプロブロット染色によるブロットされた総タンパク質の検出の例
  • メンブレンにブロットした総タンパク質の検出のコツ

10.特定のタンパク質を検出する【森山達哉】

  • はじめに
  • さまざまな特徴によって分類したタンパク質群とその検出手法
  • 特定のタンパク質検出成功のコツ

第3章 核酸の検出と定量のコツ

1.DNA・RNAの電気泳動と検出法【藤井麻子】

  • はじめに
  • 核酸の電気泳動
  • アガロースゲル電気泳動に供した核酸の検出方法
  • アガロースゲル電気泳動用分子量マーカー
  • アガロースゲル電気泳動結果の見方
  • DNA・RNAの電気泳動と検出法のコツ

2.DNA・RNAの微量定量法【藤井麻子】

  • はじめに
  • OD測定法による定量
  • 電気泳動法による定量
  • その他の簡易な定量法
  • RNAの電気泳動
  • DNA,RNAの高感度定量キット
  • DNA・RNAの微量定量法のコツ

3.RT-PCR法によるmRNAの半定量のコツ【村上 明】

  • はじめに
  • RT-PCR実験の流れ
  • プロトコール
  • RT-PCR法によるmRNAの半定量のコツ

4.リアルタイム定量PCRのコツ【吉崎美和/向井博之】

  • はじめに
  • PCR反応系構築のコツ
  • 解析方法-相対定量の考え方-

5.いろいろなポリメラーゼ:PCRの目的に合わせて選ぼう【藤井聖士/向井博之】

  • はじめに
  • 実験目的に合わせて選べる各種ポリメラーゼ
  • 今後のPCRの方向性
  • PCRを成功させるコツ

6.PCR法以外の核酸増幅方法(等温核酸増幅反応法について)【山本純子/向井博之】

  • はじめに
  • 等温核酸増幅方法
  • 最後に

7.サザンブロッティング・ノーザンブロッティングの各種検出方法【藤井麻子】

  • はじめに
  • サザンブロッティング・ノーザンブロッティングの流れ
  • 検出
  • サザンブロッティング・ノーザンブロッティングのコツ

8.レアな遺伝子のPCRクローニング【武田 理/向井博之】

  • はじめに
  • RNAの調製
  • RT-PCR
  • プラスミドへのクローニング
  • cDNA末端の迅速増幅(RACE)
  • Differential display法
  • まとめ
  • レアな遺伝子のPCRクローニングのコツ

9.遺伝子の発現解析に便利なキット類【藤井麻子】

  • はじめに
  • 組織間遺伝子発現解析
  • キット類を用いた遺伝子の発現解析のコツ

10.マイクロアレイ解析のコツ【大門尚志/辻本善政】

  • はじめに
  • DNAチップ実験の流れ
  • ハイブリダイゼーション溶液
  • 温度とホルムアミドの影響
  • ハイブリダイゼーション方法のいろいろ
  • マイクロアレイ解析のコツ

11.種々の多型検出法【藤井麻子】

  • はじめに
  • 多型検出操作の流れ
  • 多型検出のコツ

第4章 脂質の検出と定量のコツ

1.TLCによる脂質クラスの分離と検出・半定量【菅原達也】

  • はじめに
  • TLC実験の操作
  • TLC実験のコツ

2.蛍光スキャナによるTLC上の脂質の検出・定量【森山達哉】

  • はじめに
  • 実験の流れと蛍光試薬の選択
  • 用意するもの
  • 実験の流れとポイント
  • 実験例
  • 蛍光スキャナによるTLC上の脂質検出・定量のコツ

3.臨床検査キットによる脂質の定量【菅原達也】

  • はじめに
  • 種々のキットを用いた定量操作
  • 血清以外のサンプルへの応用
  • キットの節約方法の裏ワザ

4.HPLCによる脂質の分離と定量【菅原達也】

  • はじめに
  • HPLCの目的別実験例
  • HPLC分析のコツ

5.蛍光標識脂質を用いた脂質代謝・移動の検出・定量【森山達哉】

  • はじめに:蛍光標識脂質とは?
  • さまざまな蛍光標識脂質
  • 蛍光試薬のトリック:FRETとクエンチングについて
  • 蛍光標識脂質を用いた脂質代謝・検出関連の実験例
  • 蛍光標識脂質を用いた実験のコツ

6.エバポレイティブ光散乱検出器による脂質の網羅的検出・定量法【菅原達也】

  • はじめに
  • ELSDによる分析例
  • ELSD検出のコツ

7.ガスクロマトグラフィーによる脂質の検出・定量【菅原達也】

  • はじめに
  • 脂肪酸組成分析実験のポイント
  • 結果解析のポイント
  • 脂肪酸以外の脂質分析への応用
  • GC分析のコツ

8.過酸化脂質の検出・定量法【菅原達也】

  • はじめに
  • 測定方法について
  • 実験成功のコツー過酸化脂質の取り扱い
書評・感想
  • 正規のルートでは公表されないはずのコツなど、経験と長年の知識で得られるコツがまとまっている。

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  • 【本書名】実験医学別冊:バイオ実験で失敗しない! 検出と定量のコツ〜核酸からタンパク質,脂質まで,確実なデータを出す実践的ノウハウと最適なキット・機器の活用法
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