改訂第３版 顕微鏡の使い方ノート

第1章　顕微鏡の歴史【野島　博】

Ⅰ ガラスの発見

Ⅱ レンズの発明

Ⅲ 光学用レンズの作製と望遠鏡・顕微鏡の発明

Ⅳ 顕微鏡大量生産の時代

Ⅴ 分解能の限界

Ⅵ 分解能への挑戦

Ⅶ 電子顕微鏡の開発

Ⅷ 走査型プローブ顕微鏡

(1)走査トンネル顕微鏡

(2)原子間力顕微鏡

Ⅸ 新世代顕微鏡

Ⅹ バイオサイエンスにおける次世代型顕微鏡

XI 画像記録の進展

XII バイオイメージング技術の発達

第2章　各種の顕微鏡でできること

Ⅰ はじめに【坂口一紀】

Ⅱ 明視野観察（Bright Field）【坂口一紀】

Ⅲ 位相差観察（Phase Contrast）【坂口一紀】

Ⅳ 微分干渉観察（Differential Interference Contrast）【坂口一紀】

Ⅴ 暗視野観察（Dark Field）【坂口一紀】

Ⅵ 偏光観察（Polarizing）【坂口一紀】

Ⅶ 蛍光顕微鏡【阿部勝行】

Ⅷ 共焦点レーザースキャン顕微鏡【石館文善】

第3章　光学顕微鏡

Ⅰ 基礎知識【坂口一紀】

(1)光学顕微鏡の構成

(2)光学系の特徴と性能

(3)光学系の機能

(4)いろいろな観察法

Ⅱ 基本的な取り扱い【横山茂樹】

(1)はじめに

(2)顕微鏡構成

(3)使用前の初期調整

(4)顕微鏡操作

(5)顕微鏡使用上のヒント

(6)デジタルカメラ撮影

(7)デジタル画像の処理ソフト

(8)メンテナンス法

第4章　蛍光顕微鏡【阿部勝行】

Ⅰ 蛍光顕微鏡の概要

(1)目的・用途

(2)特徴

Ⅱ 蛍光の原理

Ⅲ 蛍光顕微鏡の基本構成

(1)基本構成要素

(2)蛍光顕微鏡用の光源

(3)蛍光顕微鏡用のフィルター

(4)蛍光顕微鏡用の対物レンズ

Ⅳ 基本的な使い方

(1)各部の名称

(2)標本の観察

Ⅴ よい蛍光像を得るためのポイント

(1)よい蛍光像とは

(2)適切なフィルターの選択

(3)蛍光観察に適した対物レンズの選択

(4)迷光を小さくする

(5)自家蛍光についての注意（対物レンズを除く)

(6)標本の褪色防止

Ⅵ 取り扱いと手入れのしかた

(1)顕微鏡本体の取り扱いと手入れ

(2)対物レンズの手入れ

(3)蛍光キューブ，フィルターの取り扱いと手入れ

Ⅶ 全反射蛍光顕微鏡

(1)はじめに

(2)全反射蛍光顕微鏡の原理

(3)全反射蛍光顕微鏡の構成と使用法

(4)全反射蛍光顕微鏡の応用例

(5)全反射蛍光顕微鏡使用上の注意

第5章　CCDカメラを利用した画像処理法【曽我正宣】

Ⅰ ライフサイエンス分野におけるCCDカメラ

Ⅱ CCDカメラの歴史とその原理

Ⅲ CCDカメラを選択する際のポイント

(1)各種CCDカメラ

(2)製品の性能比較のポイント

Ⅳ CCDカメラの使用方法

(1)明視野撮影

(2)蛍光撮影

Ⅴ CCDカメラを用いたいろいろなアプリケーション

(1)タイムラプスシステム

(2)デコンボリューションシステム

(3)FRAP，FLIP，PA-GFPなどのレーザーを使用したアプリケーション

(4)TIRF（全反射蛍光顕微鏡）システム

(5)FRET

第6章　共焦点レーザースキャン顕微鏡

Ⅰ はじめに【石館文善】

Ⅱ 共焦点レーザースキャン顕微鏡の特徴【石館文善】

Ⅲ 共焦点レーザースキャン顕微鏡の原理【石館文善】

Ⅳ 画像を作る【石館文善】

(1)操作を始める前の注意

(2)システムのセットアップ

(3)操作の実際（単染色試料の観察】

Ⅴ 操作の詳細【石館文善】

(1)試料の状況を双眼鏡筒で確認する

(2)スキャン時のチェックポイント

Ⅵ 多重蛍光像および3D，4Dの画像【石館文善】

(1)多重蛍光像

(2)3D（立体像再構築)

(3)4D（3Dの時系列)

(4)2D時系列

(5)試料の褪色防止

(6)画像劣化の諸要因

Ⅶ 非蛍光プローブ，反射干渉，透過光/蛍光検鏡【石館文善】

(1)非蛍光プローブ

(2)反射干渉検鏡法

(3)透過光像の作り方

(4)共焦点蛍光像と透過光像との合成

(5)多彩なスキャニングテクノロジー

Ⅷ CLSMによるスペクトルイメージング【石館文善】

(1)スペクトルイメージングの特徴

(2)スペクトルイメージングの原理

(3)効果的な使い方

(4)レファレンススペクトルをきっちり把握

(5)時々刻々変化するスペクトルの解析

(6)FRET

Ⅸ FRAP【石館文善】

Ⅹ FCS/FCCS【石館文善】

XI RICS【石館文善】

XII FLIM【石館文善】

XIII 高速イメージング【石館文善】

XIV 2光子励起顕微鏡による生体深部イメージング【横井英司】

(1)はじめに

(2)原理

(3)顕微鏡・関連機器の構成

(4)特徴・メリット

(5)脳内深部イメージングのための対物レンズのススメ

XV 光刺激【石館文善】

XVI 最新の技術動向【石館文善】

第7章　技術革新の著しい顕微鏡

Ⅰ ハイコンテンツスクリーニング【塩田　良】

Ⅱ 質量顕微鏡法【小河　潔】

Ⅲ 多光子レーザースキャン顕微鏡（MP-LSM）の応用例

はじめに【石館文善】

(1)2光子励起顕微鏡による脳内深部イメージング【横井英司】

(2)MP-LSMによる麻酔下のマウス脳神経細胞観察-1【石館文善】

(3)MP-LSMによる麻酔下のマウス脳神経細胞観察-2【石館文善】

(4)MP-LSMによる固定マウス脳神経細胞観察【石館文善】

Ⅳ 細胞培養システム内蔵型顕微鏡

はじめに【小島清嗣】

(1)インキュベータ一体型顕微鏡【小島清嗣】

(2)生細胞・組織観察時の注意点【石館文善】

Ⅴ 超解像顕微鏡

はじめに【根本隆治】

(1)Photo activated localization microscopy （PALM）【石館文善】

(2)SIM技法【根本隆治】

(3)STED （Stimulated Emission Depletion） 法【伊集院 敏】

Ⅵ 高解像度３Dライブセル光学顕微鏡【根本隆治】

Ⅶ 非線形現象を利用した顕微鏡（SHG・CARS）【林　真市】

付　録