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【スマホで読める実験医学】ヒトiPS細胞分化後も導入遺伝子の発現を維持する技術
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ヒトiPS細胞分化後も導入遺伝子の発現を維持する技術
Prevention of transgene silencing during human pluripotent stem cell differentiation
Takeshi Uenaka/Marius Wernig ：Department of Pathology, Stanford University School of Medicine（スタンフォード大学医学部病理学）
10.18958/8015-00005-0006654-00
従来は，iPS細胞分化過程で導入遺伝子がサイレンシングされ，蛍光標識やdCas9発現の維持が困難だった．本法により，神経細胞・ミクログリア分化後も安定発現を維持し，長期解析やCRISPRスクリーニングが可能となった．
導入には，通常のヒトiPS細胞培養設備に加え，PiggyBacベクター（Addgeneより入手可能），トランスフェクション試薬，薬剤選択系などが必要である．評価にはフローサイトメトリーが有用で，標的座位への挿入にはCRISPR編集技術も要する．
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