Script 1「初めての実験―わからないことを素直に伝える」
クリスティーンは，ウラノ先生の研究室に配属が決まった．今日は，彼女の研究室の最初の日であり，細胞培養の基本的な技術を学習する予定である．クリスティーンはウラノ先生と細胞培養室で会った．クリスティーンは，この機会に興奮すると同時に，やや不安も感じている．
ウラノ先生こんにちは，クリスティーン．調子はどうですか？ 私たちの一番新しいチームメンバーとして，早速始める心構えはできましたか？
クリスティーンおはようございます，ウラノ先生．元気です，ありがとうございます．準備はできています，やりますよ！
ウラノ先生よろしい．今日は，細胞培養の基本的な技術を学びましょう．私が座っている前にある，このクリーンベンチで実験を行います．ここが今日の舞台です．
クリスティーンは，熱心に聞き，見ている．
ウラノ先生まずは，ライトをつけて，クリーンベンチの表面と自分の手を，70％のエタノールで消毒しましょう．
クリスティーンなぜ，クリーンベンチと手を70％エタノールで消毒する必要があのでしょうか？
ウラノ先生注意しておくに越したことはない，ということです．クリーンベンチに入れる実験道具，ベンチの表面，私たちの手は，バクテリアなどの混入を防ぐために，すべて滅菌する必要があるのです．
細胞は，インキュベーター内で育てます．
ウラノ先生がインキュベーターを開け，293T細胞の入った10 cmの培養皿を取り出した．
そして，培養皿を部屋の別の場所にある顕微鏡のところに持って行き，レンズの下に培養皿を置いた．ウラノ先生はピントをあわせて細胞を見ている．
ウラノ先生さて，クリスティーン，これが293T細胞です．細胞を顕微鏡で見て，どのように見えるか説明してくれますか？
クリスティーンは顕微鏡をのぞきこんでいるが，困惑している様子．
ウラノ先生クリスティーン，大丈夫ですよ．マイペースでやってください．
クリスティーンええと，培養皿の底に付着している細胞が見えます．でも，何を見ているのか，はっきりわかりません．ちょっと困っています．
ウラノ先生そうだね，どの位の細胞があるかは，細胞の混み具合で表現するのが慣習なんだ．培養皿を全体として見てご覧．どのくらいの割合で，細胞が培養皿をカバーしていると思いますか？
クリスティーン培養皿の50％くらいが，接着した細胞によってカバーされているように見えます．
ウラノ先生その通り！ではこれからこの培養皿にある細胞を，２枚に分けましょう．１：２のスプリットと呼ばれる方法です．最初に，細胞を培養している培地を吸い取ります．そして，細胞を１度PBSで洗います．PBSを吸い取り，１mLのトリプシンを加えましょう．トリプシンは，37度のウォータバスで湯せんしてあります．
クリスティーン知らなくて申し訳ありませんが，トリプシンとは何ですか？
ウラノ先生トリプシンは，一種のプロテアーゼで，細胞を培養皿に付着させているタンパク質を分解するのです．培地に含まれるトリプシン阻害剤を除くために，私たちは最初に細胞を洗ったんですよ．
では細胞をトリプシン処理している間，細胞をまくための培養皿を用意しましょう．培養皿に，細胞の名前と種類，私たちのイニシャル，そして今日の日付を書いておきましょう．それぞれの培養皿には，10 mLの培地が入ります．ですので，５mLの培地が入っている培養皿に，５mLの細胞が入っている培地を加えるようにしましょう．つまり，２つのラベルした培養皿に５mLずつの培地を入れるわけです．
クリスティーンわかりました．この細胞を培養するのには，どのような培地を使用するのでしょうか？
ウラノ先生この細胞に使用する培地は，DMEMと呼ばれる培養液に10％の牛胎仔血清，１％のペニシリンとストレプトマイシン，これはペンストレップとも呼びますが，それらを含んだものです．ペンストレップは，バクテリアが増殖するのを防ぐための抗生物質です．培養液は，すでに37℃に湯せんしてあります．10分間，細胞がはがれてくるのを待って，ここでまた会いましょう．
１０分が経過し，クリスティーンは細胞培養室に戻ってきた．
ウラノ先生それでは，はがれてきた細胞を9.5 mLの培地で懸濁し，５mLずつをそれぞれの培養皿にピペットで加えましょう．そうすると，それぞれの培養皿には10 mLの培養液が入っていることになります．君も１枚の培養皿にある細胞を２枚の培養皿に分けてくれるかな．その前にはいつでも，細胞を光学顕微鏡で見て確認するようにしよう．これは難しいコンセプトです．わかりやすく説明できていればよいのですが．なにか質問はあるかな？
クリスティーンいつも細胞は，１枚から２枚へと分割して増やしていくのでしょうか？
ウラノ先生いい質問だね．細胞は，混み具合によって分割して増やしていくんだ．混んでいれば混んでいるほど，分割度を上げていく必要がありますね．つまり，例えば，もし細胞が１００％の混み具合だとすれば，私たちは１枚から４枚へと細胞を分割するでしょう．それから，細胞の種類とその増殖の早さにもよりますね．素早く増殖する細胞の場合，増殖が遅い細胞に比べて，たとえ混み具合が同じでも，分割度を上げる必要がありますね．
クリスティーンありがとうございます．
クリスティーンは，自分で細胞をまく準備ができている．
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プロフィール
- 浦野 文彦（Fumihiko Urano）
- 1994年，慶應義塾大学医学部卒業．慶應大学医学部病理学教室にて小児病理学，分子病理学を学ぶ（秦順一教授指導，元国立成育医療センター総長）．’98年からNew York University School of Medicine分子病理部門研究員（David Ron教授，現University of Cambridge教授），2002年よりUniversity of Massachusetts Medical School助教授，’08年より准教授，’11年永久教授権獲得，2012年７月よりWashington University School of Medicine, Samuel E. Schechter冠教授就任．’11年，American Society for Clinical Investigation会員に推挙される．小胞体ストレスが，老化，糖尿病，神経変性疾患に与える役割を研究しています．また，小胞体ストレス病（Wolfram syndrome）の患者，家族を支えるためのクリニックを運営しています ．興味のある方は次のサイトをご覧ください（http://www.erstress.com , http://fumihikourano.blogspot.com/ & https://wolframsyndrome.dom.wustl.edu/）．
- Christine Oslowski
- 2007年，マサチューセッツ大学を卒業し，同大学医学部医科学博士課程に入学．2012年，浦野教授の研究室で博士号を取得し，現在はボストン大学医学部でポスドクとして研究に，また教育に励んでいる．
- Marjorie Whittaker
- ボストン大学でSpeech-Language Pathologyの修士号を取得後，耳の聞こえない子供達の発音を矯正する仕事に従事．その後，外国人エンジニア，医師などの発音矯正の授業，コンサルティングを行う，The Whittaker Groupを設立する．2006年には，Lynda Katz Wilner先生とともに，ESL RULESを設立し，英語の発音に関するセミナーを主宰し，『RULES』，『Medically Speaking RULES』,『RULES BY THE SOUND』,『Medically Speaking Idioms』といった本の出版をしている．詳細は，http://www.eslrules.com；http://www.prospeech.comまたはまで．
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